본 발명은 탈세포 자궁 조직 유래 세포외기질을 포함하는 조성물 및 이의 용도에 관한 것으로, 구체적으로 자궁내막 오가노이드의 3차원 배양용 하이드로겔 조성물, 자궁내막 오가노이드 및 이의 제조방법과 용도 등에 관한 것이다. 본 발명의 탈세포 자궁 조직 유래 세포외기질을 포함하는 하이드로겔 조성물은, 탈세포 자궁 조직 유래 세포외기질의 특성, 성분, 물성을 통해 생체 내 자궁 조직 및 기관과 유사성이 매우 높은 자궁내막 오가노이드를 제조하는 데에 활용될 수 있으며, 이러한 자궁내막 오가노이드는 생체 내 이식 및 다양한 자궁 관련 질환에 대한 약물 테스트 등에 유용하게 이용될 수 있다.