본 발명은 폴리에틸렌 글리콜 하이드로젤 미세구조에의 3차원적 단백질 패터닝 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 단백질의 화학적 고정을 위해 기능기로 표면이 개질됨과 동시에 물리적으로 내부의 빈 공간에 다른 단백질을 고정할 수 있는 폴리에틸렌글리콜(PEG) 하이드로젤 미세구조를 제조함으로써 하나 이상의 효소반응이 가능하여 하나 이상의 분석물질을 동시에 검출할 수 있는 폴리에틸렌 글리콜 하이드로젤 미세구조에의 3차원적 단백질 패터닝 방법에 관한 것이다. 폴리에틸렌글리콜, 하이드로젤 미세구조, 마이크로패터닝, 바이엔자임, 단백질 고정